**篇 抗體的制備、純化及標記
一、免疫血清的制備及效價檢測
實驗1 弗氏佐劑的制備及與抗原的混合
實驗2 抗原免疫兔子
實驗3 免疫血清的分離與保存
實驗4 雙向瓊脂擴散試驗檢測兔抗羊igg血清效價
實驗5 凝集實驗檢測兔抗大腸桿菌抗血清效價
二、單克隆抗體的制備
實驗6 單克隆抗體的制備
三、抗體的純化
實驗7 鹽析法純化免疫球蛋白
實驗8 親和柱層析法純化免疫球蛋白
實驗9 sds-page法檢測免疫球蛋白純度
四、抗體的標記
實驗10 異硫氰酸熒光素標記igg抗體
實驗11 r-藻紅蛋白標記igg抗體
實驗12 辣根過氧化物酶標記igg抗體
實驗13 生物素標記igg抗體
第二篇 利用標記抗體進行的檢測
一、免疫熒光法
實驗14 直接免疫熒光法標記人t細胞
實驗15 間接免疫熒光法檢測大腸桿菌
實驗16 免疫熒光法顯示細胞的微管
二、酶免疫測定
實驗17 間接elisa檢測兔抗羊igg抗體效價
實驗18 夾心elisa法檢測小鼠血清il-2
實驗19 酶聯(lián)免疫斑點試驗檢測ifn-γ分泌細胞數目
實驗20 elispot法檢測小鼠脾臟抗羊igg抗體形成細胞數目
實驗21 應用免疫組化abc法檢測小鼠脾臟thy1.2陽性細胞的分布
實驗22 免疫印跡試驗
第三篇 免疫細胞的分離與鑒定
一、免疫細胞分離
實驗23 密度梯度離心法分離外周血單個核細胞
實驗24 percoll不連續(xù)密度梯度離心法分離nk細胞
實驗25 小鼠脾臟淋巴細胞分離及活率測定
實驗26 腫瘤浸潤淋巴細胞的制備
實驗27 黏附法分離單核細胞和淋巴細胞
實驗28 尼龍毛柱法分離t細胞與b細胞
實驗29 e-花環(huán)形成法從單個核細胞中分離t細胞
實驗30 免疫磁珠分選法分離小鼠脾臟cd4⁺t淋巴細胞
實驗31 流式細胞儀檢測小鼠ifn-γ分泌細胞
實驗32 小鼠髓源性dc的分離及誘導培養(yǎng)
二、免疫細胞鑒定
第四篇 機體免疫功能檢測
一、細胞吞噬相關功能檢測
實驗33 體外試管法檢測小鼠腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞實驗
實驗34 中性紅法檢測小鼠腹腔巨噬細胞吞噬功能
實驗35 利用流式細胞儀檢測巨噬細胞吞噬活性
實驗36 巨噬細胞一氧化氮產生量的測定
實驗37 中性粒細胞呼吸爆發(fā)的檢測
二、細胞增殖及活力檢測
實驗38 mtt比色法檢測淋巴細胞活力
實驗39 atp生物熒光檢測法檢測抗癌藥物對腫瘤細胞活力的影響
三、細胞介導的細胞毒試驗
實驗40 ⁵¹cr釋放試驗
實驗41 乳酸脫氫酶釋放試驗
實驗42 涂片染色法檢測凋亡細胞
實驗43 annexin v-fitc/pi雙染色法檢測凋亡細胞
實驗44 凋亡細胞dna電泳
實驗45 tunel技術檢測凋亡細胞
四、apc抗原提呈功能分析
實驗46 樹突狀細胞抗原提呈能力檢測
五、免疫球蛋白的定量
實驗47 單向免疫擴散法檢測小鼠血清igg、igm、iga
實驗48 夾心elisa法檢測小鼠腸液中分泌型iga水平
六、補體的細胞毒作用檢測
實驗49 補體的細胞毒作用檢測
參考文獻
附錄一 常用溶液配制方法
附錄二 荷瘤小鼠模型建立方法
一、腹水瘤小鼠模型建立方法
二、小鼠移植性實體瘤模型的建立
附錄三 南京大學生命科學學院本科生免疫學實驗教學內容及安排